الوحلة الأولى
التعرف على الأجهزة المستخدمة في مختبر الأحياء الدقيقة
الكائنات الحية الدقيقة هي مجموعة من الكائنات الحية متناهية يخ الصفر لاترى بالعين المجردة
حيث يقل حجمها إلى درجة لا تستمليع معها العين المجردة رؤيتها ؛ وهي عامة تتكون من خلية واحدة تقوم
الدقيقة لا يمكن مشاهدتها بالعين المجردة: ومع عظم تأثيرها على الإنسان سواء بالنفع أو بالضرر
ان لا بد من العمل على إيجاد الأجهزة والوسائل التي تمكننا من دراسة هذه الكائنات الحية
أنواع الأحياء الدقيقة:
]> البكتريا 2- الخمائر
وتختلف هذه الكانثات الحية يخ أنواعها وتركيبها وصفاتها ؛حيث منها النافع للإنسان مثل
الفذائي؛ والمسببة للتسمم الغذائي
(1) ال مليكروسكوب المركب:
يستخدم للتعرف على الكائنات الحية الدقيقة حيث يقوم بتكبير صورتها بما يمكننا من
دراستها والتعرف على صفاتها ؛ وكيفية الاستفادة منها
تركيب الميكروسكوب المركب:-
1- العدسة العينية ©0160 1ر15 وهي التي تثبت يذ العلرف العلوي يخ أنبوب السحب؛ وهي عبارة عن
عدسة مركبة( أي تتكون من مجموعة من العدسات)
التخصص 6 نع الوحلة الأولى
تقنية التصنيع الغناني الأحياء النقيقة في الاحتياطات الواج إتباعها
3- المسرح:حيث توضع عليها الشرائح ومزودة بفتحة ا مركزها ليمر فيها الضوء؛ وذلك حتى تكون
4- مصدر للإضاءة: عبارة عن مصدر للضوء طبيعي أو مصدر كهربي
5- المكثف: يتم عن طريقه التحكم ني قوة الإضاءة
والشكل التالي يوضح فيه الليكروسكوب المركب.
العدسة العينية
المسرح
المكثف
مني الإشائة
التخصص 6 نع الوحلة الأولى
تصني الثاني الأحياء الدقيقة في الأغنية الاحتياطات الواجب إتباعها
(2) الأوتوكلاف (المعقم)
إن معظم الدراسات الميكروبيولوجية تعتمد على المزارع النقية أي التي ينمو بها نوع واحد من
الكائنات الدقيقة؛ وهنه تتطلب لتموها غذائية معقمة. والتعقيم عبارة عن العمليات التي من شأئها
قتل أو إزالة كل الكائنات الحية الدقيقة من الوسمل المراد تفقيمه سواء كان ذلك الوسمل بي
اليل وأماكن أو مسطلحات محدودة لا أبعادها وأحجامها. والأشياء المعقمة يمكن الاحتفاظ
بها على صورة معقمة طالما أمكن المحافظة عليها من التلوث الخارجي وعادة يتم التعقيم باتباع طرق
جهاز الأوتوكلاف
عبازة عن أسحلوانة معدنية عادة تصتع من الصلب أو من سبائك معدنية قوية تتحمل ضغط قد
تصل إلى30 رطل/ بوصة؟ على الأقل؛ له غطاء يقفل بإحكام بعد أن توضع به المواد المراد تعقيمها ؛ وبمد
التأكد من احتواء الجهاز على المام إلى الارتفاع المناسب مع ترك الصنبور مفتوحا ثم يوصل التيار
الكهربي ويدفع به بخار الماء؛ وعندما يشاهد البخار خارجا بشدة من الصنبور فإن هذا يمني خلو الجهاز
من البواء وامتلاثة بالبخار. عندئز يقفل الصنبور جيدا ويترك البخار يتضغط بداخل الجهاز حتى يصل إلى
الضغط المعللوب وهو 15 رطل/ بوصة؟ ويمرف ذلك بالاستعانة بالمانومتر المتصل بالجهاز وبالتالي يصل
درجة الحرارة إلى 6و121 م وعند هذه الدرجة يحسب وقت التعقيم الذي يختلف باختلاف طبيمة المواد
وحجم المواد المراد تعقيمها. بعد انتهاء مدة التعقيم يغلق الجهاز ويترك دون فتح حتى يتخفض الضغط
بداخل الجهاز والشكل التالي يوضح صورة للاوتوكلاف
صورة جهاز الأوتوكلاف
الوجلة الأولى
الأحياء النقيقة في الأغئية الاحتياطات الواجب إتباعها
3- الحضان الكهريائي :1010010940 [111101:0010108168
هو جهاز يستخدم ا تنمية البيئات الملقحة وذلك عن طريق التحكم "ا درجة الحرارة بواسطة
4- المجفف الكهريائي 00960 110108
جهاز يستخدم لتجفيف العينات؛ الأدوات المستخدمة وذلك للتخلص من أكبر قدر من الرطوبة
الأحياء الدقيقة في الأغذية
مسادر التلوث يخ الأغذية
الجدارة:التعرف على مصادر التلوث يذ الأغنية ( الترية- البواء- الماء- الإنسان- الكائنات الحية)
1- أن يقوم المتدرب بالتعرف على مصادر التلوث المختلفة بعد إجراء الاختبارات الميكروبيولوجية
2- أن يتعلم المتدرب كيفية إعداد البيئات وتعقيمها
3- أن يقوم المتدرب باستخدام المليكروسكوب بالطريقة الصحيحة
مستوى الاداء المطلوب :أن يصل المتدرب | لى إتقان الجدارة بنسبة 795
الوقت المتوقع للتدريب على الجدارة ؛:ساعتان
الوسائل المساعدة +
1- وجود مختبر للأحياء الدقيقة مجهز بجميع الأدوات اللازمة لإجراء الاختبارات المختلفة
2- وجود بعض الأجهزة المساعدة مثل: المعقم- الحضان الكهربائتي- جهاز العد الكلي للب
3- استخدام اللوحات التوضيحية المبيئة لأشكال الكائنات الحية الن؛
متطلبات الجدارة:
ثريا
1- أن يكون المتدرب قادرا على تطبيق خملوات التجربة بدقة والتعرف على أنواع الأحياء الدقيقة التي
2- تحتاج الجدارة الى التدريب مسبقا على كيفية استخدام الأجهزة التي تستخدم "يخ الاختبار
التخصص 6 نع الوحلة الشائية
التدريب العملي الأول
انتشار الأحياء الدقيقة في الطبيعية ( مصادرتلوث الغذاء)
1- بيثة الأجار المغذي 07عة 1300101
تستخدم هذه البيثّة للحصول على مجاميع معزولة من البكتريا ؛ وهي تعتبرمن أكثر البيثات
الصلبة شيوعا يخ الأعمال البكتريولوجية. وهى عبارة عن بيئة المرق المغذي مضافا إليها الأجار
الأدوات والمواد اللازمة لتحضير البيئة
1- لترمرق مغذي بدون ضبمل ال 1011
2- أجار أجار
3- حلة ذات جدارين أو حمام مائي.
4- دليل بروم ثيمول الأزرق.
5- صندوق مقارنة الآلوان.
6- محلول ص أ يدارع. 9ع
طريقة العمل
1- تحضير المرق المفذي والذي يتكون من
آ- إذابة اللكونات يق الماء ثم الغلي يا حمام مائي ويضبمل ال 011 إلى7.
ب- الترشيح ثم التعبثة يخ أنابيب والتعقيم .يا الأوتوكلاف على121م وتحت ضغط 15 رطل/ بوصة
مربعة ولمدة 15دقيقة
2- يوضع لترمن المرق المفذي لي الحلة ذات الجدارين ويضاف إليه 15جم أجار أجار (الأجار بنسبة
3- تغلى البيئة حتى يذوب الأجار
4- إضافة قليلا من الماء لتعويض الفاقد بالتبخير
5- ضبط ال 011 لى7
6+ ترشيح البيثة وهى ساخنة بي مرشح بوخثر مع استعمال ورق ترشيح مفتت يخ ماء ساخن وعلى شكل
طبقة بين ورقتي ترشيح يخ هذا المرشح.
طريقة عمل الاختبار
1. سيح بيثة الأجار المغذي على درجة100أم ثم يبرد إلى درجة45"م قبل صب الأطباق
2. صب أطباق بتري المعقمة بالأجار ويوزع الأجار ع هذه الأطباق وذلك بتحريك العلبق حركة
دائرية بسيطة باتجاه عقرب الساعة وبعكسه. إلى الأمام وإلى الخلف بحيث ينتشر الأجار
ويتوزع توزيماً منتظماً ويراعى عدم التحريك بقوة حتى لا يتلوث غطاء العلبق بالأجار
3. يترك العلبق ليبرد الأجار ويصلب
4. بعد صلابة الأجار يجرى ما يلي؛
أمينثر قليل من التربة على سحلح الأجار
ب)بأيدي أحد العمال يمسح سملح الأجار
ت)باحد الأوعية أو الأواني المستعملة يلمس سطح الأجار
ث)تتثر بعض العلائق على سطح الأجار
ج)يترك أحد الأطباق لمدة نصف ساعة مكشوفة للهواء
ح)يكتب على غطاء الطبق نوع المعاملة
خ)يقلب العلبق بحيث يصير الغطاء إلى لأسفل والقاع إلى الأعلى حتى لا تتساقط قطرات الماء المتكشف بع
الغطاء عل للح الأجار فيممل ذلك على تداخل المجاميع البكتيرية فلا يمكن تمييزها
د)توضع الأطباق بهذه الصورة يخ الحضان 11001108108 على درجة 37 "م لمدة 48 ساعة ثم يلاحظ أشكال
وأنواع المجاميع النامية على سملح هذا الأجار
ذ) بعدذلك تفحص كل مجموعة على حدة وذلك بعد معرفة لون وشكل وسطح ونوع الحافة وانتشار هذه